主管药师考试辅导：核酸的理化性质

(一)核酸的紫外吸收

在核酸分子中，由于嘌呤碱和嘧啶碱具有共轭双键体系，因而具有独特的紫外线吸收光谱，一般在 260nm左右有最大吸收峰，可以作为核酸及其组份定性和定量测定的依据。

(二)核酸的变性、复性与杂交

1.核酸的变性

(1)核酸的变性：在理化因素作用下， 核酸分子中的氢键断裂，双螺旋结构松散分开，形成无规则单链结构的过程。变性核酸将失去其部分或全部的生物活性。核酸的变性并不涉及磷酸二酯键的断裂，其一级结构(碱基顺序)保持不变。

A型题：

DNA变性的原因是(　)

A.3’，5’磷酸二酯键的断裂

B.二硫键的断裂

C.互补碱基之间氢键断裂

D.碱基甲基化修饰

E.多核苷酸链解聚

『正确答案』C

『答案解析』DNA变性是指在某些理化因素的作用下，互补的碱基对间的氢键断裂。

(2)DNA变性后，它的一系列性质也随之发生变化：

①增(高)色效应：天然状态的DNA在完全变性后，紫外吸收(260nm)值升高,即增色效应。

②Tm值： 随DNA变性增加，260nm处的紫外光吸收值逐渐增加，该值达到最大值50%时的温度称为核酸的解链温度或融解温度，用“Tm”表示。

Tm值影响因素： GC含量，GC含量越高，Tm值越大;核酸分子量，核酸分子量越大，Tm值也越大。

A型题：

DNA的解链温度指的是(　)

A.A260nm达到最大值时的温度

B.A260nm达到最大值时的50%时的温度

C.DNA开始解链时所需要的温度

D.DNA完全解链时所需要的温度

E.A280nm达到最大值50%时的温度

『正确答案』B

『答案解析』DNA的变性从开始解链到完全解链，是在一个相当窄的温度范围内完成的，在这一范围内，紫外光吸收值达到最大值的50%时温度称为DNA的解链温度。

2.核酸的复性

复性：变性DNA在适当的条件下，两条彼此分开的单链可以重新缔合成为双螺旋结构，这一过程称为复性。DNA复性后，一系列理化性质可基本恢复，生物活性也随之恢复。

3.核酸的杂交

杂交：是以核酸的变性和复性为基础的。不同来源的核酸变性后合并在一起进行复性。只要这些核酸分子的核苷酸序列中含有可以形成碱基互补配对的片段，彼此之间即可形成局部双链，即所谓的杂化双链。这个过程叫杂交或分子杂交。

(三)探针

一段已知序列的单链核苷酸用放射性核素(如 32P、35S)或生物素标记其末端或全链，可依碱基配对规律与具有互补序列的待测核酸进行杂交，以探测它们的同源程度，这段核苷酸链称为探针。

A型题：

1.核酸对紫外线的最大吸收峰是(　)

A.220nm

B.240nm

C.260nm

D.280nm

E.300nm

『正确答案』

2.DNA变性时其结构变化表现为(　)

A.磷酸二脂键断裂

B.N-C糖苷键断裂

C.戊糖内C-C键断裂

D.碱基内C-C键断裂

E.对应碱基间氢键断裂

『正确答案』E

3.核酸中含量相对恒定的元素是(　)

A.氧

B.氮

C.氢

D.碳

E.磷

『正确答案』E

B型题

A.α-螺旋

B.β-折叠

C.PolyA尾

D.m7GpppNm

E.双螺旋结构

1.真核生物mRNA3’-端特征(　)

『正确答案』C

2.DNA的二级结构特征(　)

『正确答案』E