2020主管检验技师《微生物与寄生虫》知识点：真菌的基本微生物检验方法

真菌的基本微生物检验方法

　　直接检测法

　　1.不染色标本的直接检查：用低倍镜和高倍镜检查，观察时有酵母型细胞、菌丝、菌丝体和孢子。

　　2.染色标本检查：观察酵母型细胞、菌丝、菌丝体和孢子。

　　(1)革兰染色：适用酵母菌和类酵母菌，酵母型细胞和菌丝、孢子被染为G ⁺ 紫色。

　　(2)墨汁负染色：适用隐球菌。可见新型隐球菌宽厚荚膜。

　　(3)乳酸酚棉兰染色：适用各种真菌的检查。酵母型细胞、菌丝和孢子被染为蓝色。

　　(4)瑞氏染色：适用于骨髓和外周血中的荚膜组织胞浆菌。

　　3.直接检测抗原：可以用乳胶凝集试验、ELISA检测血清和脑脊液标本中的隐球菌抗原。也可以用胶乳聚集试验检测标本中白色念珠菌抗原。

　　培养检查法

　　1.常用真菌培养基

　　沙保弱培养基：深浅部真菌的常规培养；

　　皮肤真菌试验培养基：分离皮肤真菌;

　　左旋多巴-枸橼酸铁和咖啡酸培养基：分离新生隐球菌；

　　马铃薯葡萄糖琼脂：观察真菌菌落色素，用于鉴别真菌；

　　脑心葡萄糖血琼脂：培养深部真菌，使二相性真菌呈酵母型;

　　尿素琼脂：鉴别酵母菌和类酵母菌，石膏样毛癣菌和红色毛癣菌;

　　玉米粉聚山梨酯-80琼脂：培养白色假丝酵母菌。

　　2.培养方法

　　试管培养：是真菌分离培养、传代和保存菌种最常用方法。

　　玻片培养：主要用于在显微镜下观察真菌的自然形态和结构及生长发育的全过程。可用于真菌菌种鉴定。

　　平皿培养：观察菌落形态，只能培养生长繁殖较快的真菌。

　　3.鉴定：主要依靠菌落特点、菌丝和孢子的形态特点，菌丝体上有无特殊的结构。

　　生化反应

　　常用的有糖类发酵试验、同化碳源试验等。

　　真菌毒素检测

　　生物学方法、薄层层析法、液相色谱法、间接竞争ELISA法等。

　　药敏试验

　　定量试验：观察最小抑菌浓度。

　　定性试验：将受试菌对药物的敏感性进行分级。

　　根据培养基不同主要分为液基法和固基法。

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