答案部分
一、A1
1、
【正确答案】 C
【答案解析】 有限稀释法不需特殊设备,克隆出现率高,为实验室最常用的方法。
2、
【正确答案】 C
【答案解析】 杂交瘤技术的原理是利用聚乙二醇(PEG)为细胞融合剂,使免疫的小鼠脾细胞与具有体外长期繁殖能力的小鼠骨髓瘤细胞融为一体,在HAT选择性培养基的作用下,只让融合成功的杂交瘤细胞生长,经过反复的免疫学检测、筛选和单个细胞培养(克隆化),最终获得既能产生所需单克隆抗体,又能长期繁殖的杂交瘤细胞系。
3、
【正确答案】 B
【答案解析】 杂交瘤细胞由骨髓瘤细胞和脾细胞融合形成的,其合成DNA的主要途径虽然被氨基蝶呤(A)阻断。
4、
【正确答案】 A
【答案解析】 杂交瘤细胞有骨髓瘤细胞和脾细胞融合形成的,其合成DNA的主要途径虽然被氨基蝶呤阻断,但由于与脾细胞融合,可获得其HGPRT,利用次黄嘌呤合成为嘌呤碱,最终与嘧啶一起合成DNA。因此,杂交瘤细胞在选择性得以生存,故能够在HAT培养基长期存活。
5、
【正确答案】 B
【答案解析】 单克隆抗体来源于一个(克隆)B细胞,因此具有两个完全相同的抗原结合部位。其他都不是单克隆抗体分子都有的特性。
6、
【正确答案】 D
【答案解析】 培养基中有三种关键成分:次黄嘌呤(H)、氨甲蝶呤(A)、胸腺嘧啶核苷(T),所以取三者的字头称为HAT培养基。只有融合细胞具有亲代双方遗传性能,才能在HAT培养基上长期存活与繁殖,而骨髓瘤细胞是次黄嘌呤磷酸核酸核糖转化酶(HGPRT)的缺陷株,不能生长。
7、
【正确答案】 C
【答案解析】 使用细胞融合剂造成细胞膜一定程度的损伤,使细胞易于相互粘连而融合在一起。最佳的融合效果应是最低程度的细胞损伤而又产生最高频率的融合。聚乙二醇(PEG1000-2000)是目前最常用的细胞融合剂,一般应用浓度为40%(W/V)。
8、
【正确答案】 A
【答案解析】 杂交瘤细胞形成后的初期很不稳定,为确保单克隆抗体的专一性及避免其他阴性细胞对其生长影响,必须将阳性杂交瘤细胞进行单细胞分离培养,产生单克隆杂交瘤细胞,经2~3次检测均为阳性的杂交瘤单个细胞,才能进行克隆化培养。
9、
【正确答案】 E
【答案解析】 杂交瘤细胞保存最好在-196℃的液氮中。
10、
【正确答案】 A
【答案解析】 双特异性不同的两个小分子抗体连接在一起可得到双特异性抗体。
11、
【正确答案】 E
【答案解析】 双特异性抗体能同时结合两种抗原,因而可介导标记物与靶抗原结合或某些效应因子定位于靶细胞,在免疫学检测中可简化操作步骤,提高检验质量;应用双特异性抗体介导的药物杀伤效应可用于肿瘤等的治疗。
12、
【正确答案】 B
【答案解析】 人-鼠嵌合抗体是将人IgG C区与鼠IgV区连接,导入细胞内表达制备而成的抗体。
13、
【正确答案】 A
【答案解析】 杂交瘤细胞 由骨髓瘤细胞和脾细胞融合形成的杂交瘤细胞,其合成DNA的主要途径虽然被氨基蝶呤阻断,但由于与脾细胞融合,可获得其HGPRT,利用次黄嘌呤合成为嘌呤碱,最终与嘧啶一起合成DNA。因此,杂交瘤细胞在选择性培养得以生存而被筛选出来。
14、
【正确答案】 A
【答案解析】 生产单克隆抗体细胞最常用的培养方法是:①动物体内诱生方法:先在小鼠腹腔注射液体石蜡或福氏不完全佐剂,一周后将杂交瘤细胞悬液注射腹腔,1~2周后,无菌抽取腹水,离心取上清液即可。②体外培养法:是实验室制备的方法。将杂交瘤细胞置培养瓶中培养,待培养液颜色改变或细胞过多开始死亡时,收集上清液,离心去掉碎片及细胞即可。综上,生产单克隆抗体细胞最常用的培养方法为液体培养。
15、
【正确答案】 B
【答案解析】 多数天然的抗原分子具有多种抗原决定簇,每一种决定簇可激活具有相应抗原受体的B细胞产生针对某一抗原决定簇的抗体。
16、
【正确答案】 B
【答案解析】 将融合细胞进行充分稀释,进行克隆化处理,再将阳性细胞进行再次克隆化。
17、
【正确答案】 D
【答案解析】 单克隆抗体纯度高,与抗原结合的特异性强,理化性状高度均一有效抗体含量高,但抗原抗体反应仍受pH、温度及盐类浓度的影响。
18、
【正确答案】 B
【答案解析】 抗体融合蛋白的应用1.肿瘤的体内显像诊断2.病毒的诊断和抗病毒感染3.血液性疾病的诊断