血清酶催化活性浓度和代谢物浓度酶法检测技术
一、A1
1、影响酶活性测定的因素下列选项最合适的是
A、底物浓度
B、酶反应的最适pH
C、最适温度
D、试剂中表面活性剂的作用
E、以上都是
2、SI制的酶单位Katal的含义
A、每秒钟能催化1μmol底物的酶量为1Katal
B、每分钟能催化1μmol底物的酶量为1Katal
C、每秒钟能催化1个单位的底物的酶量为1Katal
D、每分钟能催化1个单位的底物的酶量为1Katal
E、每秒钟能催化1mol的底物的酶量为1Katal
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3、酶反应动力学定量时的观察对象是
A、总单位时间内酶的减少或增加的量
B、总单位时间内底物减少或产物增加的量
C、总反应时间内酶的减少或增加的量
D、总反应时间内底物减少或产物增加的量
E、单位时间内酶的减少或增加的量
4、目前酶偶联法已成为应用最广、最频繁的测酶活性浓度的方法,其与一般酶反应有一个重要区别在于
A、节省试剂
B、反应时间短
C、有一个明显的延滞期
D、特异性强
E、敏感度高
5、下列说法错误的是
A、在检测试剂中底物浓度、辅因子、活化剂、复构剂的种类和浓度均对酶的测定至关重要
B、以底物的种类和浓度最为重要
C、在多种底物中,Km最大的底物往往是此酶的生理底物
D、米氏方程在选择酶测定底物浓度有着重要的指导作用
E、pH影响酶的稳定
6、下列说法错误的是
A、最常用的耦联指示系统有两个:一个是脱氢酶系统,另一个为氧化酶系统
B、以脱氢酶为指示酶的系统测定的是辅酶Ⅰ(NAD+)或辅酶(NADP+)在540nm处的吸光度增高来计算出被测物的浓度
C、可利用脱氢酶的逆反应,将NAD(P)H变为NAD(P),测定340nm处吸光度的下降来计算被测物的浓度
D、终点法受到乳糜、黄疸和溶血的影响,测定时需设定样品空白
E、为了消除内源性脱氢酶的干扰,在反应时一般加入乳酸脱氢酶的抑制剂
答案部分
一、A1
1、
【正确答案】 E
【答案解析】 影响酶活性的因素包括底物的浓度、酶反应的最适pH、最适温度、酶的抑制作用,另外还包括试剂中表面活性剂的作用等因素。
2、
【正确答案】 E
【答案解析】 近年来国际上大力推广SI制,我国已明确SI制为法定计量单位制,此时酶活性单位为Katal,即1秒钟转化1个摩尔底物的酶量,常用单位为μKatal或nKatal。
3、
【正确答案】 B
【答案解析】 酶反应动力学主要研究酶催化反应的过程与速率,以及各种影响酶催化速率的因素,定量时的观察对象是总单位时间内底物的减少或产物增加的量。
4、
【正确答案】 C
【答案解析】 酶偶联反应与一般酶反应的一个重要区别是有一个明显的延滞期。从酶反应开始至稳态期间,指示酶反应较慢且不稳定,称为延滞期。
5、
【正确答案】 C
【答案解析】 一般而言,在多种底物中,Km最小的底物往往是此酶的生理底物。选择Km小的底物测定酶还有一个优点,就是在最大反应速度V的底物浓度也将最低。在实际工作中可能意味着试剂成本可能较低,不易出现底物难溶解的困难。
6、
【正确答案】 B
【答案解析】 以脱氢酶为指示酶的系统测定的是辅酶Ⅰ(NAD+)或辅酶(NADP+)在340nm处的吸光度增高来计算出被测物的浓度,也可利用脱氢酶的逆反应,将NAD(P)H变为NAD(P),测定340nm处吸光度的下降来计算被测物的浓度。