答案部分
一、A1
1、
【正确答案】 C
【答案解析】 有限稀释法不需特殊设备,克隆出现率高,为实验室最常用的方法。
2、
【正确答案】 B
【答案解析】 杂交瘤细胞由骨髓瘤细胞和脾细胞融合形成的,其合成DNA的主要途径虽然被氨基蝶呤(A)阻断。
3、
【正确答案】 A
【答案解析】 杂交瘤细胞有骨髓瘤细胞和脾细胞融合形成的,其合成DNA的主要途径虽然被氨基蝶呤阻断,但由于与脾细胞融合,可获得其HGPRT,利用次黄嘌呤合成为嘌呤碱,最终与嘧啶一起合成DNA。因此,杂交瘤细胞在选择性得以生存,故能够在HAT培养基长期存活。
4、
【正确答案】 C
【答案解析】 杂交瘤技术的原理是利用聚乙二醇(PEG)为细胞融合剂,使免疫的小鼠脾细胞与具有体外长期繁殖能力的小鼠骨髓瘤细胞融为一体,在HAT选择性培养基的作用下,只让融合成功的杂交瘤细胞生长,经过反复的免疫学检测、筛选和单个细胞培养(克隆化),最终获得既能产生所需单克隆抗体,又能长期繁殖的杂交瘤细胞系。
5、
【正确答案】 B
【答案解析】 单克隆抗体来源于一个(克隆)B细胞,因此具有两个完全相同的抗原结合部位。其他都不是单克隆抗体分子都有的特性。
6、
【正确答案】 C
【答案解析】 多发性骨髓瘤是浆细胞异常增生的恶性肿瘤,细胞有恶性变化。
7、
【正确答案】 A
【答案解析】 杂交瘤细胞形成后的初期很不稳定,为确保单克隆抗体的专一性及避免其他阴性细胞对其生长的影响,必须将阳性杂交瘤细胞进行单细胞分离培养,产生单克隆杂交瘤细胞,经2~3次检测均为阳性的杂交瘤单个细胞,才能进行克隆化培养。
8、
【正确答案】 E
【答案解析】 杂交瘤细胞保存最好在-196℃的液氮中。
9、
【正确答案】 A
【答案解析】 细胞杂交瘤技术中细胞融合的选择培养基含有三种关键成分:次黄嘌呤(H)、氨基蝶呤(A)、胸腺嘧啶核苷(T),缩写为HAT培养基。
10、
【正确答案】 A
【答案解析】 制备单克隆抗体的方法是用缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转化酶或胸腺嘧啶核苷酸酶的瘤细胞变异株与经免疫的小鼠脾脏的B细胞融合。
11、
【正确答案】 B
【答案解析】 杂交瘤细胞是两个不同特性的细胞融合成一个异型核细胞,这两种细胞分别是小鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞,分泌鼠源性单克隆抗体。
12、
【正确答案】 E
【答案解析】 杂交瘤细胞应及时冻存,以保证细胞不会因污染或过多传代变异丢失染色体而丧失功能。目前均采用液氮保存细胞。
13、
【正确答案】 E
【答案解析】 双特异性抗体分子可介导标记物与靶抗原结合或某些效应因子定位于靶细胞,在免疫学检测中可简化操作步骤,提高检验质量。应用双特异性抗体介导的药物杀伤效应可用于肿瘤等的治疗。
14、
【正确答案】 A
【答案解析】 HAT系次黄嘌呤(hypoxantin)、氨基蝶昤(aminopterin)和胸腺嘧啶核苷(thymidin)三种物质各英文首字之缀列,HAT培养基也就是指含有这三种物质的细胞培养基。
15、
【正确答案】 C
【答案解析】 多发性骨髓瘤是B细胞系恶性肿瘤,其特点是稳定易培养、自身不分泌免疫球蛋白及细胞因子、融合率高,是次黄嘌呤磷酸核酸核糖转化酶的缺陷株,为理想的脾细胞融合对象。
16、
【正确答案】 B
【答案解析】 人-鼠嵌合抗体是将人IgC区与鼠IgV区连接,导入细胞内表达制备而成的抗体。
17、
【正确答案】 A
【答案解析】 生产单克隆抗体细胞最常用的培养方法是:①动物体内诱生方法:先在小鼠腹腔注射液体石蜡或福氏不完全佐剂,一周后将杂交瘤细胞悬液注射腹腔,1~2周后,无菌抽取腹水,离心取上清液即可。②体外培养法:是实验室制备的方法。将杂交瘤细胞置培养瓶中培养,待培养液颜色改变或细胞过多开始死亡时,收集上清液,离心去掉碎片及细胞即可。综上,生产单克隆抗体细胞最常用的培养方法为液体培养。
18、
【正确答案】 A
【答案解析】 双特异性抗体(BsAb)又称双功能抗体(BFA),它的两个抗原结合位点具有不同的特异性,应用于结合两种不同的抗原分子,在生物医学中有着重要的意义。
19、
【正确答案】 A
【答案解析】 选择培养基的作用下,只有B细胞(脾细胞)与骨髓瘤细胞融合的杂交细胞才能具有持续培养的能力,形成同时具备抗体分泌功能和保持细胞永生性两种特征的细胞克隆。
20、
【正确答案】 E
【答案解析】 噬菌体抗体库技术是将体外克隆的抗体基因片段插入噬菌体载体,转染工程细胞进行表达,然后用抗原筛选即可获得特异的单克隆睡菌体抗体。利用这一技术可以得到完全人源性的抗体,在HIV等病毒感染和肿瘤的诊断与治疗方面有其独特的优越性。
二、B
1、
【正确答案】 C
【答案解析】 次黄噤呤磷酸核酸核糖转化酶是HGPRT。
【正确答案】 D
【答案解析】 甲氨蝶呤是叶酸的拮抗药。