2020临床医学检验技士《免疫检验》第四章考点：基因工程抗体制备

第三节 基因工程抗体制备

　　原本的抗体多来自于异种动物，具有较强的抗原性，不能应用于人体，故利用基因重组和蛋白工程技术将其进行改型，称为基因工程抗体。

　　其优点包括：

　　①通过基因工程技术的改造，可以降低甚至消除人体对抗体的排斥反应;

　　②基因工程抗体的分子量较小，可以部分降低抗体的鼠源性，更有利于穿透血管壁，进入病灶的核心部位;

　　③根据治疗的需要，制备新型抗体;

　　④生产成本低。

　　一、人源化抗体

　　主要目的是减少抗体的异源性，以利于临床应用。

　　(一)嵌合抗体 从杂交瘤细胞中分离出功能性可变区基因，与人Ig恒定区的基因连接，构建鼠-人嵌合质粒载体，转染宿主细胞，表达鼠-人嵌合抗体。

　　(二)改形抗体 将人抗体可变区中互补决定簇(CDR)序列改换成鼠源单抗CDR序列。重构成既具有鼠源性单抗的特异性又保持抗体亲合力的人源化抗体。

　　二、小分子抗体

　　小分子抗体包括可变区(Fv)、单链可变区片段(ScFv)和单区抗体(SdAb)等。此种抗体分子量小，可在大肠杆菌等原核细胞表达，在人体内穿透力强，有利于疾病的治疗。

　　三、抗体融合蛋白

　　抗体融合蛋白是指利用基因工程技术将抗体片段与其他生物活性蛋白融合所得的产物。由于融合蛋白的不同，这种抗体融合蛋白具有多种生物学功能，并且表达的重组蛋白既不影响单链抗体的抗原结合能力，也不影响与之融合的蛋白质的生物学特性。

　　四、双特异性抗体

　　双特异性抗体(BsAb)又称双功能抗体(BFA)，它的两个抗原结合位点具有不同的特异性，应用于结合两种不同的抗原分子。

　　五、噬菌体抗体库技术

　　将体外克隆的抗体基因片段插入噬菌体载体，转染工程细菌进行表达，然后用抗原筛选即可获得特异的单克隆噬菌体抗体。利用这一技术可以得到完全人源性的抗体，在HIV等病毒感染和肿瘤的诊断与治疗方面有其独特的优越性。

　　(一)基本原理和程序

　　构建噬菌体抗体库通常包括以下几个过程：

　　1.从外周血或脾、淋巴结等组织中分离B淋巴细胞，提取mRNA并反转录为cDNA;

　　2.应用抗体轻链和重链引物，根据建库的需要通过PCR技术扩增不同的Ig基因片段;

　　3.构建噬菌体载体;

　　4.表达载体转化细菌，构建全套抗体库。

　　(二)噬菌体抗体库技术的特点

　　1.模拟天然全套抗体库

　　2.避免使用人工免疫和杂交瘤技术

　　3.可获得高亲合力的人源化抗体

　　以教材大纲知识点为指导，精作试题，让你备考复习做题一步到位，提高复习效率

　　在线题库、最新考试动态，网校课程辅导资料获取,加入卫生资格考试交流群：741262248有专门老师为你解答

　　【焚题库】检验技师考试题库【历年真题+章节题库+模拟考生+考前模拟试题】