抗血清的鉴定和保存
一、抗血清的鉴定
1.抗体特异性的鉴定 常用双向免疫扩散法。
(1)粗抗原及纯抗原之间皆有一条沉淀线,且两者互相融合,则已产生单价特异性抗体;
(2)若纯化抗原出现一条,而粗抗原出现多条线,且一条沉淀线与纯抗原沉淀线相连接,需去除杂抗。
(3)若不出现沉淀线,表示免疫失败。
2.抗体效价的测定 颗粒性抗原采用凝集试验,可溶性抗原采用双向免疫扩散试验(棋盘滴定)、ELISA等方法。
3.抗体纯度的鉴定 采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、双向免疫扩散试验、免疫电泳等。若只出现一条蛋白电泳区带说明抗体纯化已达到要求。
4.抗体亲和力的鉴定 以亲和常数表示。
二、抗血清的保存
1.2~8℃保存:用于短期保存;
2.冷冻保存:是常用的抗体保存方法。将抗体分为小包装,在-80~-20℃保存,一般可保存5年,但应避免反复冻融;
3.真空干燥保存:用真空冻干机进行干燥,封装后可长期保存,一般在冰箱中可保存5~10年。
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