2020临床医学检验技士《免疫检验》第二章讲义：抗血清的纯化

抗血清的纯化

　　抗血清纯化的目的是除去不相关成分，防止抗血清中的其他杂抗体干扰试验结果。最常见的是提取抗血清中的特异性IgG或单价抗体。

　　一、特异性IgG抗体

　　1.盐析法　多采用硫酸铵盐析法或硫酸钠盐析法。

　　2.凝胶过滤法　蛋白质分子量不同，通过凝胶介质时的洗脱速度不同。血清蛋白的分级分离常用该法。按分子大小可分为3组：第1组：IgM和一些脂蛋白;第2组：IgG和较少量的IgA、IgD、IgE等;第3组：白蛋白、血清黏蛋白、转铁蛋白等。该法过滤条件温和，不影响IgG活性。常结合盐析法提取IgG。

　　3.离子交换层析法 常用的离子交换剂是DEAE纤维素。该法可获得较纯的IgG，且不影响抗体活性。

　　4.亲和层析法 将纯化抗原制成亲和层析柱，抗血清通过层析柱时，IgG被层析柱吸附。然后改变洗脱条件，使IgG从层析柱上解离。

　　二、单价特异性抗血清

　　单价特异性是指血清只与其特异性抗原发生反应。免疫得到的抗血清总是有抗白蛋白等杂抗体存在。杂抗体的去除有两种方法：

　　1.亲和层析法

　　2.吸附剂方法

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