要点4:
铁染色
(1)原理
细胞外含铁血黄素和幼红细胞内的铁与酸性亚铁氰化钾发生普鲁士蓝反应,形成蓝色的亚铁氰化铁沉淀,定位于含铁的部位。
(2)正常血细胞的染色反应
1)细胞外铁:观察骨髓小粒中的铁,呈弥散蓝色、颗粒状、小珠状或块状。根据骨髓小粒中铁的存在方式及量将细胞外铁分为(-)、(+)、(++)、(+++)、(++++)。
细胞外铁染色真实图
2)细胞内铁:观察100个中幼红细胞和晚幼红细胞计算出铁粒幼红细胞的百分比。铁粒幼红细胞是指胞质中出现蓝色铁颗粒的幼红细胞,根据蓝色铁颗粒多少、粗细分为Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型及环形铁粒幼红细胞。环形铁粒幼红细胞是指幼红细胞胞质内蓝色在5颗以上,围绕核周1/3以上者。成熟红细胞中出现铁颗粒称为铁粒红细胞。
环形铁粒幼细胞(细胞内铁染色)
(3)参考值
1)细胞外铁:(+)~(++),大多为(++)。
2)铁粒幼细胞:12%~44%
由于各实验室的实验条件不同,正常值也有差异,应建立本实验室的正常值。
(4)临床意义
1)缺铁性贫血时,骨髓细胞外铁明显减低,甚至消失;铁粒幼细胞的百分率减低。经有效铁剂治疗后,细胞外铁增多;因此铁染色可作为诊断缺铁性贫血及指导铁剂治疗的重要方法。
2)铁粒幼细胞贫血时,出现较多环铁粒幼细胞,铁粒幼细胞也增多,其所含铁颗粒的数目也较多,颗粒也粗大,有时还可见铁粒红细胞。因此本染色可作为诊断铁粒幼细胞性贫血的重要方法。
3)骨髓增生异常综合征时铁粒幼细胞的百分比可增高,其所含铁颗粒的数目可增多,环铁粒幼细胞常见。在铁粒幼细胞难治性贫血,环铁粒幼细胞在15%以上。
4)非缺铁性贫血如溶血性贫血、营养性巨幼细胞贫血、再生障碍性贫血和白血病,细胞外铁正常或增高,铁粒幼细胞正常或增高。
5)感染、肝硬化、慢性肾炎及尿毒症、血色病及多次输血后,骨髓细胞外铁增加。
过氧化酶染色判断为4+阳性的标准是
A.颗粒粗大、密集、分布较广,占胞质的1/2~2/3
B.颗粒较粗、局灶分布
C.颗粒成团块状,充满胞质,并覆盖胞核
D.颗粒细小、弥散分布
E.无颗粒
【正确答案】C
【答案解析】POX染色原理是血细胞内的过氧化酶分解H2O2,释出初生态氧,使无色联苯胺氧化成蓝色联苯胺,后者进一步变成棕黑色化合物,沉着于胞质内。结果判断:阳性结果为胞质内出现棕黑色颗粒。①(一),无颗粒。②(±),颗粒细小、弥散分布。③(+),颗粒较粗、局灶分布。④(++),颗粒粗大、密集、分布较广,占胞质的1/2~2/3。⑤(+++),颗粒粗大、成团块,几乎布满胞质。⑥(++++),颗粒成团块状,充满胞质,并覆盖胞核。
过碘酸-雪夫反应化学染色中复染所用试剂是
A.中性红
B.甲基绿
C.苏木精
D.刚果红
E.沙黄
【正确答案】B
【答案解析】细胞化学染色过程基本上分固定、显示和复染三个步骤。复染的目的在于使各种细胞能显示出来以便观察。选择复染液的颜色应与有色沉淀的颜色有明显的对比度,既能使细胞结构显示又能清楚的看出细胞化学染色的结果。过碘酸-雪夫反应化学染色中复染所用试剂是甲基绿,铁染色复染常用中性红。
NAP检测在下列疾病鉴别中应用正确的是
A.类白血病反应与慢性粒细胞性白血病:前者明显下降且常为零分,后者明显增加
B.原发性血小板增多症与继发性血小板增多症:前者无明显变化,后者常增加
C.恶性淋巴瘤与恶性组织细胞病:前者常下降,后者常增加
D.再生障碍性贫血和阵发性睡眠性血红蛋白尿:前者积分值增高,后者积分值减低
E.真性红细胞增多症与继发性红细胞增多症:前者无明显变化,后者常增加
【正确答案】D
【答案解析】中性粒细胞碱性磷酸酶染色(NAP)对许多疾病有鉴别诊断意义。例如在细菌性感染时NAP积分值增高,而慢性粒细胞白血病的NAP积分值明显减低,常为“0”。因此本法常用来鉴别慢粒和类白血病反应及观察慢粒疗效的指标之一。再生障碍性贫血的NAP积分值增高,阵发性睡眠性血红蛋白尿的NAP积分值减低,因此本法可作为鉴别阵发性睡眠性血红蛋白尿和再生障碍性贫血的方法之一。
真性红细胞增多症的NAP积分值升高,而继发性红细胞增多症的NAP积分值无明显变化。因此本法可用来鉴别真性红细胞增多症和继发性红细胞增多症;原发性血小板增多症NAP积分值可增高,继发性血小板增多症NAP积分值减低。恶性淋巴瘤NAP积分值常增加,而恶性组织细胞病NAP积分值常下降。
过碘酸-雪夫反应染色结果呈显粗颗粒状或块状的血液病是
A.急性淋巴细胞白血病
B.急性粒细胞白血病
C.急性单核细胞白血病
D.巨幼细胞贫血
E.再生障碍性贫血
【正确答案】A
【答案解析】过碘酸-雪夫反应染色(PAS染色),又称糖原染色。阳性反应可分为:(1)细颗粒,均匀红色,见于分化好的原始粒细胞;(2)粗颗粒状或块状,见于淋巴细胞,此染色主要用于诊断急性淋巴细胞性白血病。
以下哪项组合不正确,
A.急粒白血病:POX阳性率常≥3%
B.急单白血病:α-醋酸萘酚酯酶常阳性
C.急淋白血病:PAS染色阳性
D.慢粒白血病:中性粒细胞碱性磷酸酶染色积分明显增高
E.红白血病:幼红细胞PAS常阳性
【正确答案】D