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2020年主管检验技师《微生物与寄生虫检验》知识点:微生物学检验概述

来源:考试网    2020-07-03   【

第六章 微生物学检验概述

  临床微生物检验的目的和要求

  临床微生物检验的目的

  1.为临床感染性疾病的诊断提供病原学依据。

  2.为临床感染性疾病的治疗提供参考用药的信息。

  3.为医院感染提供病原微生物及其耐药性动态信息。

  4.改进或更新临床微生物检验的方法。

  临床微生物学检验的要求

  1.快速、准确地提出检验报告。

  2.检验人员必须有较丰富的微生物学基础知识和熟练、正确的操作技能,必须养成有菌观点和无菌操作的习惯。

  3.临床微生物检验必须进行全面质量控制,并参加和接受质量控制考核。

  4.重视实验室消毒灭菌工作。

  诊断试验的选择原则

  1.选择有鉴定价值的试验。

  2.选择简易、快速、方便的试验。

  3.综合考虑试验的敏感性和特异性。

  标本的采集和运送

  标本采集一般原则

  1.早期

  2.无菌

  3.方法

  4.适量

  5.安全

  1.早期采集

  病程早期、急性期或症状典型时,而且必须在使用抗生素或其他抗菌药物之前采集。

  2.无菌采集

  严格进行无菌操作;

  与外界相通的腔道,如窦道标本应由窦道底部取样;

  从正常菌群寄生部位(如口腔)采集的标本,采用特殊选择性培养基;

  盛标本的无菌容器须先经高压灭菌、煮沸、干热等物理方法灭菌,或用一次性无菌容器,而不能用化学处理。

  3.根据目的菌的特性用不同的方法采集

  如尿液标本,疑为厌氧菌感染时,应以无菌注射器从耻骨上缘行膀胱穿刺术抽取;若怀疑是需氧或兼性厌氧菌的感染,则可通过自然导尿获取标本。

  4.采集适量标本

  采集量不应过少,有些标本还要注意在不同时间采集不同部位标本。如肠热症患者,发病的第1周应采集血液,第2周应采集粪便和尿液,否则影响细菌检出率。

  5.安全采集

  采集标本时要注意安全,防止传播和自身感染。

  标本的处理

  立即送检:一些对环境敏感的细菌如脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌和流感嗜血杆菌等应保温并立即送检。

  适当保存:支气管洗液、心包液、痰、尿等标本应保存在4℃环境中。脑脊液、滑膜液要在25℃保存。保存时间不超过24h。

  安全防护

  运送包装:防止渗漏。

  微生物检验

  直接镜检:初步诊断,5~10min。标本经涂片染色或制备湿片镜检,有些标本如尿液、脑脊液等经过离心浓缩后镜检出其初步结果对疾病诊断有参考价值。直接镜检对于确定进一步检出步骤及鉴定方法也很有帮助。另外,直接镜检还可评价标本是否符合检验要求。

  快速诊断:特异性抗原和核酸检测。

  直接药敏试验

  报告:直接镜检2h内报告;初步鉴定和直接药敏24h;最后鉴定和细菌药敏结果一般不超过3d。

  血清学诊断

  人体感染病原体后经过一定时间产生特异性抗体,这种抗体在体内一般可持续数月或更长,用已知抗原检测病人血清中抗体。

  一般要在病程早期和晚期分别采血清标本2~3份检查,抗体效价呈4倍或以上增长才有价值。

  临床微生物实验室安全措施和质量保证

  实验室感染来源

  1.微生物气溶胶。

  2.接触感染材料或使之附着于衣服带出室外、菌液滴落于物体表面,注射时不慎刺破皮肤等。

  感染性废弃物的处理

  1.任何污染材料未经消毒不能拿出实验室。

  2.液体废弃物必须收集在防漏、未破的容器内,经高浓度的化学消毒剂处理。

  3.对剩余标本、接种过的培养基、菌种等丢弃前均需适当消毒。

  4.动物房的废物在处理前及动物笼被清洗前均需消毒,最好经高压蒸气灭菌。

  5.对于任何有污染的锐器如针头、注射器、玻片等在处理前不要用手接触。

  微生物实验室的室内质控

  1.对细菌检验人员的要求;

  2.操作手册;

  3.仪器设备的功能监测;

  4.培养基的质量控制;

  5.试剂、染色液以及抗生素的质量控制;

  6.标本检验的质量控制;

  7.标准菌株的来源和保存及室内质量的全面控制。

  动物试验

  主要用途:分离和鉴定病原微生物,检测细菌毒性产物,观察病原微生物的致病性。

  实验动物:大鼠、小鼠、豚鼠、家兔及绵羊等。

  接种方法:皮下/皮内/肌内/腹腔/静脉/脑内注射等。

  发光分析技术

  依赖酶或化学反应释放能量引起发光物质(如鲁米诺、荧光素等)发光的检测方法。

  根据发光原理,主要分为生物及化学发光两种方法。

  鲎试验

  鲎试验阳性表明有革兰染色阴性菌或内毒素血症,也可用于生物制品或注射液的内毒素污染检测。

  分子生物学在病原微生物中的应用

  分子生物学:从分子水平上研究生物的生命活动及其规律的科学。

  基因诊断:应用基因工程技术对生物体的基因组DNA片段及其转录产物进行定性和定量分析,进而对人体状态和疾病作出诊断。

  (一)核酸杂交

  (二)聚合酶链式反应

  (三)生物芯片技术

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