初级检验技师临床免疫学和免疫检验考点试题：酶免疫技术的特点

1.酶联免疫吸附试验(ELISA)中应用最多的底物是

A、邻苯二胺(OPD)

B、四甲基联苯胺(TMB)

C、对硝基苯磷酸酯

D、ABTS

E、以上都不是

参考答案: B

题目解析:TMB具有稳定性好，成色无需避光，无致突变作用等优点，已成为目前ELISA中应用最广泛的底物。

2.下列对血清中酶活力的测定的描述哪一项是错误的

A、可测定产物生成量

B、可测定底物消耗量

C、需最适温度

D、需最适pH

E、与底物浓度无关

参考答案: E

题目解析:酶促反应中需要最适pH、温度及过量的底物，反应速度可用一定时间内产物生成量或底物消耗量来反映。

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3.酶免疫技术中酶的要求

A、易与抗体或抗原偶联，标记后酶活性保持稳定

B、酶的活性要强，催化反应的转化率高，纯度高

C、作用专一性 强，酶活性不受样品中其他成分的影响

D、酶催化底物后产生的产物易于判断或测量，方法简单易行、敏感和重复性好

E、以上都是

参考答案: E

题目解析:1.酶的活性要强，催化反应的转化率高，纯度高。

2.易与抗体或抗原偶联，标记后酶活性保持稳定，且不影响标记抗原与抗体的免疫反应性。

3.作用专一性 强，酶活性不受样品中其他成分的影响，受检组织或体液中不存在与标记酶相同的内源性酶或抑制物。用于均相酶免疫测定的酶还要求当抗体与酶标抗原结合后，酶活性可出现抑制或激活。

4.酶催化底物后产生的产物易于判断或测量，方法简单易行、敏感和重复性好。

4.辣根过氧化物酶的酶活性基团为

A、糖蛋白

B、亚铁血红素

C、醛基

D、活跃糖基

E、羟基

参考答案: B

题目解析:辣根过氧化物酶由糖蛋白和亚铁血红素组成，其酶活性基团为亚铁血红素。

5.下列说法错误的是

A、AP系统的敏感性一般高于应用HRP系统

B、一般采用四甲基联苯胺作为AP的底物

C、TMB是ELISA中应用最广泛的底物

D、AP较难得到高纯度制剂，稳定性较HRP低，价格较HRP高，制备酶结合物时得率也较HRP低

E、β-半乳糖苷酸的底物常用4-甲基酮基-R-D半乳糖苷

参考答案: B

题目解析:邻苯二胺为在ELISA中应用最多的底物。一般采用对硝基苯磷酸酯作为碱性磷酸酶(AP)的底物。在ELISA中应用AP系统，其敏感性一般高于应用HRP系统，空白值也较低。但AP较难得到高纯度制剂，稳定性较HRP低，价格较HRP高，制备酶结合物时得率也较HRP低。在ELISA中，β-半乳糖苷酸的底物常用4-甲基酮基-R-D半乳糖苷。

6.HRP与底物TMB反应后的测定波长为

A、278nm

B、450nm

C、495nm

D、403nm

E、492nm

参考答案: B

题目解析:TMB是一种优于OPD的新型HRP色原底物。TMB经HRP作用后变为蓝色，加入硫酸终止反应后变为黄色，最大吸收峰波长为450nm。

7.HRP与TMB反应后，加H2SO4终止反应前呈

A、蓝色

B、棕黄色

C、橙黄色

D、黄色

E、紫色

参考答案: A

题目解析:TMB是一种优于OPD的新型HRP色原底物。TMB经HRP作用后变为蓝色，加入硫酸终止反应后变为黄色，最大吸收峰波长为450nm。

8.选择ELISA的标记用酶，下面哪一项特性是不需要的

A、标记抗原后，酶活性保持稳定

B、具有可与抗原、抗体结合的基团

C、当酶标抗原与抗体结合后酶活性可出现激活或抑制

D、酶催化底物反应后生成的信号易于测定、重复性好

E、酶的稳定性、可溶性好

参考答案: C

题目解析:选择ELISA的标记用酶，保证标记抗原后，酶活性保持稳定。

9.HRP与底物OPD反应后的测定波长为

A、278nm

B、450nm

C、495nm

D、403nm

E、492nm

参考答案: E

题目解析:OPD被认为是HRP最为敏感的色原底物之一。OPD在HRP的作用下显橙黄色，加强酸如硫酸或盐酸终止反应后呈棕黄色，最大吸收峰在492nm波长。

10.用于标记的HRP的RZ值应大于

A、2.4

B、3.0

C、3.5

D、1.5

E、5.0

参考答案: B

题目解析:用于酶免疫技术的HRP，其RZ值应大于3.0。

11.ELISA板包被后，最常用的封闭物质是

A、人白蛋白

B、人球蛋白

C、牛血清白蛋白

D、鼠白蛋白

E、牛血清球蛋白

参考答案: C

题目解析:ELISA板包被后最常用的封闭物质是牛血清白蛋白。

12.ELISA中最常用的固相载体是

A、聚氯乙烯

B、聚苯乙烯

C、三聚氰胺

D、尼龙膜

E、琼脂糖

参考答案: B

题目解析:目前国内外一般均使用聚苯乙烯塑料，此种材料具有很好的光透性和蛋白吸附能力，且很容易加工成试管、微孔板、微球、珠、膜等形状的固相，价格低廉。