常用血清酶和同工酶测定的临床意义
1.连续监测法测定血清肌酸激酶(CK)
2.连续监测法测定乳酸脱氢酶(LD)总活性
3.连续监测法测定血清(天)门冬氨酸氨基转移酶(AST)
4.连续监测法测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)
5.连续监测法测定血清碱性磷酸酶(ALP)
6.连续监测法测定血清中谷氨酰基转移酶(GGT)
7.淀粉酶(AMY)测定
8.比色法测定酸性磷酸酶(ACP)
(一)连续监测法测定血清肌酸激酶(CK)
CK是由两种不同的亚基M和B组成的二聚体。
正常人体中有三种同工酶,即CK-BB(CK1)、CK-MB(CK2)和CK-MM(CK3)。
CK作用后生成的磷酸肌酸含高能磷酸键,是肌肉收缩时能量的直接来源。
CK需要镁离子激活。
1.原理
酶偶联反应测定CK活性浓度。
在340nm监测NAD(P)H的生成量,可计算出CK的活性浓度。
2.生理变异
年龄、性别和种族对CK含量都有一定影响。
CK含量和肌肉运动密切相关。
3.参考值
男性38~174U/L(37℃);
女性26~140U/L(37℃)。
4.临床意义
升高:
(1)心肌梗死。心肌梗死发生后2~4h此酶即开始升高,12~48h达最高峰值,可高达正常上限的10~12倍,在2~4天降至正常水平。
(2)病毒性心肌炎。
(3)肌营养不良症、皮肌炎、骨骼肌损伤。
(4)脑血管意外、脑膜炎、甲状腺功能低下等疾病及一些非疾病因素如剧烈运动、各种插管及手术、肌肉注射冬眠灵和抗生素。
降低:甲亢,长久卧床者总CK(主要为CK-MM)可下降。
5.CK同工酶检测原理及临床意义
CK是由两种不同的亚基M和B组成的二聚体,正常人体中有三种同工酶:
在细胞线粒体内还有另一种CK同工酶,称为CK-Mt。
(1)检测方法:琼脂糖凝胶电泳法
CK同工酶免疫特性和电泳迁移率各不相同。在电泳时,CK-BB迁移最快,走在阳极白蛋白区;CK-MB居中,位于α2和β球蛋白区;CK-MM最慢,位于阴极γ-球蛋白区;CK-Mt迁移率最低,位于CK-MM之后。电泳后进行酶促反应显色,观察结果。
(2)临床意义:正常血清中绝大部分为CK-MM的活性,含有少量的CK-MB,CK-BB含量极少,用一般方法测不出。
CK同工酶活性的变化见于以下情况。
1)CK-MB是目前公认的诊断急性心肌梗死最有价值的生化指标。(诊断心梗现多用免疫化学法测定其质量)
2)肌营养不良:肌肉创伤、皮肌炎患者CK-MM明显增高。
3)心肌梗死以外的心脏疾患有时也可有血清CK-MB的轻度升高。
常见疾病的血清总CK和CK同工酶变化
疾病 |
总CK |
CK同工酶 |
急性心肌梗死 |
常用酶中升高最早(4~8h),24h达峰值,2~3d恢复正常,中度升高 |
确诊心梗试验之一,大于总酶的6%有意义,2~3d恢复正常 |
心肌炎肌肉损伤(挫伤、手术、肌注、剧烈运动等) |
急性期轻度升高,可达5倍正常上限。升高程度和损伤程度相关,严重者可达10000U/L以上,肌注仅轻度升高,一日内恢复正常 |
CK-MB可增高,CK-MM升高为主,CK-MB/CK活性比<6% |
多发性肌炎和肌炎 |
明显升高 |
主要为CK-MM |
神经性肌肉疾患 |
正常 |
无变化 |
脑血管意外(脑出血,脑血栓) |
部分患者血液和CSF中CK升高 |
CK-BB |
甲状腺功能低下 |
可高达正常上限50倍 |
主要为CK-MM |
运动试验 |
可轻度升高 |
CK-MB正常 |
恶性肿瘤(通常见于前列腺癌、小细胞肺癌、消化道癌) |
不定 |
CK-BB轻度升高 |
(二)连续监测法测定乳酸脱氢酶(LD)总活性
乳酸脱氢酶是一种含锌的氧化还原酶类,人体以心、肾、骨骼肌含量最丰富,其次为肝、脾、胰及肺组织含量亦较多。
1.原理
340nm处吸光度的增加速率与样品中LD活性成正比。
2.生理变异
血清LD高低和性别关系不大,婴儿酶活性可达成年人两倍,儿童和少年活性比成年人高10%~l5%。
3.参考值 血清LD-P法:109~245U/L(成人)。
4.临床意义
血清LD活性增高主要见于心肌梗死、肝病、肺梗死、恶性肿瘤、白血病、恶性淋巴瘤等的辅助诊断。
某些肿瘤转移后所致的胸、腹水中LD活性往往也升高。
5.LD同工酶检测原理及临床意义
LD是由H亚基和M亚基构成的四聚体,不同的组合方式构成五种同工酶。
1)方法 琼脂糖电泳法
血清LD同工酶目前常用琼脂糖凝胶电泳法测定。
2)临床意义
LD同工酶在组织中的分布可将其分为三类。
以LD1为主,主要在心肌,可占总酶的50%,也存在于红细胞内;
以LD5为主,存在于横纹肌,肝中也有;
以LD3为主,存在于肺、脾等。
在成年人存在着如下规律:LD2>LD1>LD3>LD4>LD5
①急性心肌梗死发作后早期,LD1升高更早更明显,可致LD1/LD2比值增高。
②活动性风湿性心肌炎、急性病毒性心肌炎及某些溶血性疾病,肾坏死、假性肥大性肌营养不良等,LD1及LD2的活性也升高。
③当急性肺部病变、白血病、胶原病、心包炎、病毒感染等LD2及LD3增高。而恶性病时,LD3也常增高。
④肝炎、急性肝细胞损害及骨骼肌损伤时LD5常常增高。而当心肌梗死并发充血性心力衰竭时,LD5也可升高。
常见疾病LD总酶和LD同工酶的变化
疾病 |
LD总酶 |
LD同工酶 |
心肌梗死 |
升高最慢(8~10d)升高时间长(5~10d)可高于正常上限10倍 |
LD1>LD2,可持续两周 |
充血性心衰,心肌炎 |
可高于正常上限5倍 |
LD1>LD2 |
病毒性肝炎 |
部分患者可高于正常上限5倍 |
LD5>LD4 |
肝硬化 |
轻度升高 |
LD明显升高,LD5>LD4 |
原发性肝癌 |
部分病例升高 |
同上 |
梗阻性黄疸 |
不定 |
常LD4>LD5 |
肌肉损伤 |
视损伤程度而异 |
以LD5升高为主 |
恶性肿瘤 |
可升高 |
以LD3为主,LD3>LD1 |
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