2021年临床检验技师考试《化学检验》知识点辅导：血浆蛋白质的测定

血浆蛋白质的测定、参考值、方法评价及其临床意义

　　许多疾病可引起血浆蛋白变化，分析这些变化在临床上有重要价值。

　　蛋白质测定方式大体可分为：

　　1.用化学法定量测定血清(浆)总蛋白、白蛋白和球蛋白的含量及白蛋白与球蛋白的比例;

　　2.电泳方法将血浆蛋白初步分离，半定量检测主要组分及图谱，并用相对百分比表示;(可以了解血清蛋白质全貌)

　　3.用免疫化学法特异测定个别蛋白，如用免疫比浊法测前清蛋白。

　　测定较纯的蛋白质样品可以用紫外分光光度法。

　　(一)血清总蛋白测定方法及临床意义

　　1.测定方法

　　凯氏定氮法：是血浆总蛋白测定的参考方法。

　　双缩脲比色法：是推荐方法，用于常规检测。

　　原理：蛋白质分子中的肽键在碱性条件下与Cu2+作用生成紫红色络合物，颜色深浅在一定范围内与蛋白含量成正比。

　　经与同样处理的蛋白标准液比较，即可求得蛋白质含量。

　　优点是清、球蛋白的反应性相近，操作简单，重复性好，干扰物质少，(乳糜血可干扰其测定)缺点是灵敏度较低。

　　2.临床意义

　　血清总蛋白有生理性波动。

　　新生儿为46～70g/L，3岁及以上青少年为60～80g/L，成人为64～83g/L(直立行走)和60～78g/L(卧床)。

　　血清总蛋增高：

　　(1)血液浓缩导致总蛋白浓度相对增高：严重腹泻、呕吐、高热时急剧失水，休克时，慢性肾上腺皮质功能减退的患者，也可出现浓缩现象。(假性增高)。

　　(2)血浆蛋白质合成增加：主要是球蛋白合成增加，见于多发性骨髓瘤患者等。

　　血清总蛋白降低：

　　(1)蛋白质丢失

　　如肾病综合征、严重烧伤、大出血等，使蛋白质大量丢失;

　　(2)长期摄入不足及消耗增加

　　如食物中长期缺乏蛋白质或慢性胃肠道疾病所引起的消化吸收不良、肿瘤、结核、甲亢等;

　　(3)各种慢性肝病时

　　蛋白质(尤其是白蛋白)合成减少;

　　(4)各种原因引起的血液稀释

　　导致总蛋白浓度相对降低：如静脉注射过多低渗溶液或因各种原因引起的钠、水潴留。

　　(二)血清清蛋白测定方法及其临床意义

　　1.测定方法：溴甲酚绿法(BCG法)

　　溴甲酚绿是一种阴离子染料，Alb的pI=4.7，在pH4.2的缓冲液中，与白蛋白结合成复合物，溶液由黄色变成蓝绿色，在628nm波长的吸光度与白蛋白浓度成正比，经与同样处理的白蛋白标准液比较，即可求得白蛋白的含量。

　　2.临床意义

　　(1)清蛋白浓度增高：除严重脱水，血浆浓缩而使清蛋白增高外，尚未发现单纯清蛋白浓度增高的疾病。

　　(2)清蛋白浓度降低：同总蛋白浓度降低。

　　(三)球蛋白的含量及白蛋白与球蛋白的比例

　　1.球蛋白的含量：是通过血清总蛋白测定值减去血清清蛋白测定值计算出来的。

　　2.临床意义

　　(1)增高：多见于炎症、免疫系统疾病和肿瘤。

　　1)细菌、病毒、寄生虫引起的急慢性感染：结核病、麻风病、疟疾、黑热病、血吸虫病、病毒性肝炎。

　　2)自身免疫性疾病：系统性红斑狼疮、硬皮病、风湿热、类风湿性关节炎等。

　　3)多发性骨髓瘤和淋巴瘤：多发性骨髓瘤是由浆细胞恶性增殖造成的异常高的单一Ig(多见于IgA或IgG)血症。淋巴瘤也属单克隆疾病。

　　(2)球蛋白浓度降低：

　　见于血液稀释、严重的营养不良、胃肠道疾病等。

　　3.清蛋白与球蛋白比值(A/G比值)

　　A/G比值反映了清蛋白与球蛋白浓度变化的关系。正常A/G比值为1～2/1。临床上常用A/G比值来衡量肝脏疾病的严重程度。

　　当A/G比值小于1时，称比值倒置，为慢性肝炎或肝硬化的特征之一。

　　(四)血清蛋白电泳分析

　　1.原理

　　血清中各种蛋白质的等电点不同，在同一pH电场中所带电荷量也不同，加之蛋白质的分子量亦不相同，所以在同一电场中电泳迁移率就有差异。

　　用醋酸纤维素薄膜做载体，用pH8.6的缓冲溶液电泳，血浆蛋白带负电荷，按其泳动速度可将血清(浆)蛋白质成分分为五条区带，从正极到负极依次为白蛋白和α1、α2、β、γ-球蛋白，白蛋白跑得最快，含量高，染色颜色最深，γ-球蛋白跑得最慢，α1区带染色最浅。

　　通过染色和光密度扫描可计算出各区带蛋白质占总蛋白的百分含量，是了解血清(浆)蛋白质全貌的有价值的方法。

　　2.临床意义：血清蛋白电泳图谱的分型为临床疾病诊断提供依据。

　　异常血清蛋白质电泳图谱的分型及其特征

　　肾病型：图形表现为Alb降低，α2和β升高;

　　肝硬化型：图形表现为Alb降低，γ球蛋白明显增高，可出现β和γ难以分离而连接在一起的“β-γ”桥;

　　急性反应时相型：常以α1、α2增高为特征;

　　慢性炎症型：则以Alb降低，α2、γ增高较为常见;

　　M蛋白血症主要见于多发性骨髓瘤，电泳时可在β和γ之间出现一条狭窄的区带，称M区带。

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