2020临床医学检验技士《免疫检验》第二章讲义：抗血清的制备

抗血清的制备

　　抗血清的制备是将制备好的免疫原按照一定的免疫程序接种给所选择的动物，该动物在含有多种抗原表位的抗原刺激下，体内多个B细胞克隆被激活并产生针对某一抗原多种不同表位的抗体，其混合物为多克隆抗体。采集动物血液，分离含有抗体的血清，即为抗血清。

　　一、免疫动物的选择

　　常用的有家兔、绵羊、豚鼠、鸡、山羊和马。

　　1.抗原来源与动物种属差异越大，免疫原性越强，免疫效果越好。

　　2.抗体需求量大时，可选用马、绵羊等大动物。抗血清需求量少时，可选用家兔、豚鼠和鸡等小动物。

　　3.抗血清分为R型和H型

　　4.抗原的性质：对于蛋白质抗原大部分动物皆适合，常用的是山羊和家兔。在某些动物体内有类似物质时，蛋白质抗原对这些动物免疫原性极差，如IgE对绵羊、胰岛素对家兔、多种酶类对山羊，免疫后均不易产生抗体。

　　二、免疫程序

　　1.免疫原的剂量：免疫原剂量过大或过小都可使动物产生免疫耐受，在一定剂量范围内，免疫原剂量越大，产生的抗体效价越高。

　　2.免疫途径：有皮内、皮下、肌内、静脉、腹腔、淋巴结等途径。皮内或皮下免疫时一般采用多点注射。初次免疫一般选择皮内接种，加强免疫和颗粒性抗原一般选择静脉注射。宝贵抗原可选择淋巴结内微量注射法。

　　3.免疫间隔时间：间隔时间过短，极易造成免疫抑制。若间隔时间太长，则刺激减弱，抗体效价不高。第1次与第2次免疫间隔时间以10～20天为好，第3次及以后的间隔一般为7～10天。

　　三、动物采血法

　　动物经免疫3～5次后，如抗血清鉴定合格，应在末次免疫后5～7天及时采血。

　　1.颈动脉采血法：该法最常用，适用于家兔、绵羊、山羊等动物。最多可获70～80ml，—般50ml左右。

　　2.心脏采血法：家兔、豚鼠、大鼠和鸡等动物。

　　3.静脉采血法：家兔可用耳中心静脉采血，山羊和绵羊可用颈静脉采血。

　　动物采血后，应尽快分离血清，分离血清的方法常采用室温自然凝固，然后置37℃或4℃使血块收缩后，收集血清。

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