2019年<临床检验初级检验技师考试>第十九章第二节补体总活性测定

第二节补体总活性测定

已应用于科研和临床的方法包括：

CP-CH50是临床常规进行的补体总活性检测项目，AP-CH50尚未列入检验常规。

而MBL途径活性测定的可靠方法暂未建立。

因此，通常述及的CH50系指CP-CH50。

基于经典途径的CP-CH50和应用于C3旁路检测的AP-CH50。

(一)CH50测定法的原理

补体最主要的活性是溶细胞作用。特异性抗体与红细胞结合后可激活补体，导致红细胞表面形成跨膜小孔，使胞外水分渗入，引起红细胞肿胀而发生溶血。

补体溶血程度与补体的活性相关，但非直线关系。在一个适当的、稳定的反应系统中，溶血反应对补体的剂量依赖呈一特殊的S形曲线。

以溶血百分率为纵坐标，相应血清量为横坐标，可见在轻微溶血和接近完全溶血时，对补体量的变化不敏感。

S形曲线在30%～70%之间最陡，几乎呈直线，补体量的少许变动，也会造成溶血程度的较大改变，即曲线此阶段对补体量的变化非常敏感。

因此，实验常以50%溶血作为终点指标，它比100%溶血更为敏感，这一方法称为补体50%溶血实验(50% complement hemolysis)，即CH50。

(二)CH50测定方法

在正式试验之前，应调制红细胞浓度、滴定溶血素效价。

1.红细胞浓度的调整

2.溶血素滴定

3.稀释缓冲液 磷酸缓冲液或巴比妥缓冲液等均可用于溶血试验。

4.50%溶血标准管 做CH50试验时，应同时配制50%溶血标准管。

5.50%溶血总补体值的计算

(三)方法评价与临床意义

CH50测定补体活性，方法简便、快速，虽敏感性较低，但可以满足对血清补体含量测定的要求。

该法主要检测的是补体经典途径的溶血活性，所得结果反映补体C1～C9等9种成分的综合水平。

严重肝病或营养不良时，由于蛋白合成障碍，可不同程度地引起血清补体水平的下降。

在细菌感染，特别是革兰阴性细菌感染时，常因补体旁路途径的活化而引起血清补体水平的过度降低。

心肌梗死、甲状腺炎、大叶性肺炎、糖尿病、妊娠等情况下，血清补体水平常见升高。

补体检测常可用于自身免疫病的诊断，也可作为某些疾病活动期的参考指标。