第三节生物素-亲和素系统的特点
一、灵敏度
生物素与蛋白质和核酸类等生物大分子结合形成的生物素衍生物,不仅保持了大分子物质的原有生物活性,而且比活度高,具多价性。此外,每个亲和素分子有四个生物素结合部位,可同时以多价形式结合生物素化的大分子衍生物和标志物。因此,BAS具有多级放大作用,使其在应用时可极大地提高检测方法的灵敏度。
二、特异性
亲和素与生物素间的结合具有极高的亲和力,其反应呈高度专一性。因此,BAS的多层次放大作用在提高灵敏度的同时,并不增加非特异性干扰。而且,BAS结合特性不会因反应试剂的高度稀释而受影响,使其在实际应用中可最大限度地降低反应试剂的非特异作用。
三、稳定性
亲和素与生物素间的亲和常数比抗原一抗体反应至少高1万倍,二者结合形成的复合物的解离常数很小,呈不可逆反应性;而且酸、碱、变性剂、蛋白溶解酶以及有机溶剂均不影响其结合。因此,BAS在实际应用中,产物的稳定性高,从而可降低操作误差,提高测定的精确度。
四、适用性
生物素和亲和素均可制成多种衍生物,不仅可与酶、荧光素和放射性核素等各类标记技术结合,用于检测体液、组织或细胞中的抗原一抗体、激素一受体和核酸系统以及其他多种生物学反应体系;而且也可制成亲和介质,用于分离提纯上述各反应体系中的反应物。