第五节抗血清的纯化
抗原免疫动物制备的抗血清是成分复杂的混合物,除含有特异性抗体外,还存在与目的抗体不相关的成分最常见的是提取抗血清中的特异性IgG或单价抗体。
一、特异性IgG抗体
1.盐析法 多采用硫酸铵盐析法或硫酸钠盐析法
2.凝胶过滤法
血清蛋白的分级分离常用凝胶过滤法,按分子大小可分为3组:第1组包括IgM和一些脂蛋白;第2组主要是IgG和较少量的IgA、IgD、IgE等;第3组主要是白蛋白、血清黏蛋白、转铁蛋白等。
3.离子交换层析法
4.亲和层析法
二、单价特异性抗血清
单价特异性是指血清只与其特异性抗原发生反应。
免疫得到的抗血清总是有抗白蛋白等杂抗体存在。杂抗体的去除有两种方法:
1.亲和层析法
2.吸附剂方法