第三节影响抗原抗体反应的因素
抗原抗体反应的两大影响因素:
反应物自身因素
环境因素
一、反应物自身因素
1.抗体因素
不同来源的抗体,反应性各有差异,抗体的浓度、特异性和亲和力都影响抗原抗体反应,为提高试验的可靠性,应选择高特异性、高亲和力的抗体作为诊断试剂。等价带的宽窄也影响抗原抗体复合物的形成,单克隆抗体不适用于沉淀反应。
2.抗原因素
抗原的理化性状、分子量、抗原决定簇的种类及数目均可影响反应结果。
颗粒性抗原出现凝集反应,可溶性抗原出现沉淀反应。单价抗原与相应抗体结合不出现沉淀现象。
二、环境因素
1.电解质
抗原与抗体发生特异性结合后,虽由亲水胶体变为疏水胶体,若溶液中无电解质参加,仍不出现可见反应。为了促成沉淀物或凝集物的形成,常用0.85%NaCl或各种缓冲液作为抗原及抗体的稀释液。
2.酸碱度
抗原抗体反应必须在合适的pH环境中进行,蛋白质具有两性电离性质,因此每种蛋白质都有固定的等电点。抗原抗体反应一般在pH6~9之间进行。有补体参与的反应pH为7.2~7.4。
3.温度
在一定范围内,温度升高可加速分子运动,抗原与抗体碰撞机会增多,使反应加速。一般为15~40℃。常用的抗原抗体反应温度为37℃。温度如高于56℃,可导致已结合的抗原抗体再解离。适当振荡也可促进抗原抗体分子的接触,加速反应。