2020年临床检验技士考试章节知识点：血液分析仪及其临床应用：检测原理

检测原理

　　(一)电阻抗法(库尔特原理)

　　1.库尔特原理

　　将等渗电解质溶液稀释的细胞悬液置入不导电的容器中，将小孔管插进细胞悬液中。小孔管内充满电解质溶液，并有一个内电极，小孔管的外侧细胞悬液中有一个外电极。当接通电源后，位于小孔管两侧的电极产生稳定电流，稀释细胞悬液从小孔管外侧通过小孔管壁上宝石小孔(直径<100μm，厚度约75μm)向小孔管内部流动，使小孔感应区内电阻增高，引起瞬间电压变化形成脉冲信号，脉冲振幅越高，细胞体积越大，脉冲数量越多，细胞数量越多，由此得出血液中血细胞数量和体积值。

　　2.白细胞分类计数原理

　　根据电阻抗法原理，经溶血剂处理的、脱水的、不同体积的白细胞通过小孔时，脉冲大小不同，将体积为35～450fl白细胞分为256个通道。

　　3.血红蛋白测定原理

　　当稀释血液中加入溶血剂后，红细胞溶解并释放出血红蛋白，血红蛋白与溶血剂中的某些成分结合形成一种血红蛋白衍生物，在特定波长(530～550nm)下比色，吸光度变化与稀释液中Hb含量成正比，最终显示Hb浓度。如含氰化钾的溶血剂，与血红蛋白作用后形成氰化血红蛋白，其最大吸收峰接近540nm。

　　(二)光散射法血液分析仪检测原理

　　1.白细胞计数和分类计数原理

　　(1)激光与细胞化学法

　　(2)容量、电导、光散射法

　　(3)电阻抗与射频法

　　(4)多角度偏振光散射(MAPSS)法

　　2.红细胞检测原理

　　3.血小板检测原理

　　4.网织红细胞计数原理

　　(1)激光与细胞化学法

　　1)过氧化物酶检测通道：

　　白细胞

　　过氧化物酶染色

　　嗜酸，中性，单核

　　白细胞总数和分类计数，白细胞散点图

　　吸光率(酶反应强度)为x轴，光散射(细胞大小)为Y轴。

　　2)嗜碱性粒细胞/分叶核检测通道

　　血液与酸性表面活性剂反应，不仅红细胞溶解，而且除嗜碱性粒细胞外，其他所有白细胞膜均被破坏，胞质溢出，仅剩裸核。当激光束照射到细胞时，产生不同强度的散射光，形成二维细胞图，其中，嗜碱性粒细胞呈高狭角散射，定位于细胞图上部，裸核细胞则位于细胞图下部。

　　嗜碱性粒细胞-核分叶性散点图

　　(2)容量、电导、光散射(VCS)法

　　1)利用电阻抗法原理测量细胞体积(V)

　　2)利用电导(C)技术测量细胞内部结构

　　3)利用光散射(S)技术测量细胞形态和核结构

　　(3)电阻抗与射频法

　　1)嗜酸性粒细胞检测系统：采用电阻抗法计数嗜酸性粒细胞。

　　2)嗜碱性粒细胞检测系统：采用电阻抗法计数嗜碱性粒细胞。

　　3)白细胞分类检测系统：采用电阻抗和射频(能透入细胞内，测量核大小、颗粒多少)法。

　　4)幼稚细胞检测系统

　　根据幼稚细胞膜上脂质较成熟细胞少的特性进行检测。在细胞悬液中加入硫化氨基酸，幼稚细胞的结合量多于较成熟的细胞，幼稚细胞对溶血剂有抵抗作用，当加入溶血剂后，成熟细胞被溶解，幼稚细胞不被破坏，从而提供幼稚细胞信息(IMI)。

　　(4)多角度偏振光散射(MAPSS)法

　　当激光束照射到单个细胞时，从4个角度测定散射光密度：

　　①0°：前角光散射(1°～3°)，可测定细胞大小;

　　②10°：狭角光散射(7°～11°)，可测定细胞内部结构特征;

　　③90°：垂直光散射(70°～110°)，可测定细胞核分叶情况;

　　④﹣90°：消偏振光散射(70°～110°)，可将嗜酸性粒细胞和其他细胞区分出来。

　　红细胞参数

　　血小板参数

　　白细胞参数