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2020年临床检验技士考试章节知识点:红细胞检查概要

来源:考试网    2020-05-12   【

概要

  红细胞生理 RBC生成

  衰老红细胞主要在脾破坏,分解为铁、珠蛋白和胆红素。

  血红蛋白(hemoglobin,Hb)

  1.Hb分子结构和特点

  (1)结构:由两对珠蛋白肽链和4个亚铁血红素构成。

  ①珠蛋白:4条肽链(α、β链)

  ②亚铁血红素:原卟啉、铁

  (2)特点

  ①正常情况下,99%血红蛋白为还原血红蛋白 ,1%为高铁血红蛋白。

  ②只有Fe2+状态的血红蛋白才能与氧结合,称为氧合血红蛋白。

  ③出生后3个月,HbA占95%以上,而HbF<1%。

  ④血红蛋白合成受红细胞生成素、雄激素调节。

  ⑤血红蛋白相对分子质量为64458。

  ⑥血红蛋白降解产物为珠蛋白、血红素。

  红细胞计数

  【检测原理】

  1.手工显微镜法: 用等渗稀释液将血液稀释一定倍数,充入血细胞计数池,在显微镜下计数一定体积内的红细胞数,经换算求出每升血液中红细胞数量。

  稀释→充池→计数→计算

  2.血液分析仪法:用电阻抗和(或)光散射原理。

  【稀释液】

  1.Hayem液

  氯调渗,硫防聚,高汞防腐且有毒。

  2.枸橼酸钠稀释液:

  枸橼酸钠 ---抗凝和维持渗透压

  甲醛   ---防腐和固定红细胞

  氯化钠  ---调节渗透压

  蒸馏水

  3.普通生理盐水或加1%甲醛的生理盐水。

  改良牛鲍计数板(血细胞计数板)

  【血细胞计数板口诀】

  改良牛鲍H型,上下两池容点1,

  四角中央五大格,四角单线白细胞,

  单线分成16中,中央双线红与血,

  双线分成25中,每中单线16小。

  【操作方法】

  稀释液2ml+血10μl→混匀→充池→静止3~5min →镜检

  【计算】

  白细胞影响:

  通常白细胞总数较少,仅相当于红细胞的1/500~1/1000,对结果影响很小,可以忽略不计。但白细胞过高者(WBC>100 ×109/L),红细胞计数结果应进行校正。

  校正方法有两种:

  一:直接将患者红细胞数减去白细胞数。

  二:在高倍镜下勿将白细胞计入,白细胞体积常比红细胞略大,中央无凹陷,细胞核隐约可见,无黄绿色折光。

  【方法学评价】

  1.手工显微镜法

  是传统方法,不需要特殊设备,但操作复杂、费时。

  2.血液分析仪法

  是常用方法,比手工法精确(如电阻抗计数法的变异系数为2%,手工法则大于11%),且操作简便、快速。当白细胞数量明显增高时,会干扰红细胞计数和体积测定而产生误差。成本高,环境条件要求高。

  【质量控制】

  1.手工法:误差原因

  ①样本:血液发生凝固,使细胞计数减少或分布不均。

  ②操作:稀释、充池、计数不规范。

  ③器材:微量吸管、计数板不标准。

  ④固有误差(计数域误差)

  2.仪器法: 应严格按规程操作,并定期进行室内质控和室间质评。

  【参考值】

  成年男性:(4.0~5.5)×1012/L

  成年女性:(3.5~5.0)×1012/L

  新生儿:(6.0~7.0)×1012/L

  医学决定水平:

  高于6.8×1012/L,应采取治疗措施。

  低于参考值低限,为诊断贫血界限。

  低于1.5×1012/L,应考虑输血。

  【临床意义】

  1.生理性变化

  ●增多

  年龄、性别、精神因素、剧烈体力劳动或运动、新生儿、高原居民等。

  ●减少

  老年人、妊娠中后期等。

  2.病理性变化

  (1)RBC和Hb减少

  贫血:单位容积血液中RBC数量、Hb量或HCT低于参考值的下限。

  1)急、慢性红细胞丢失过多: 各种原因出血,如消化性溃疡、痔疮、十二指肠钩虫病等。

  2)红细胞寿命缩短: 各种原因溶血,如输血溶血反应、蚕豆病、遗传性球形细胞增多症等。

  3)造血原料不足 :如慢性失血者、先天性或后天性红细胞酶缺陷者、铁粒幼细胞贫血;某些药物,如异烟肼、硫唑嘌呤等;继发于某些疾病,如类风湿性关节炎、白血病、甲状腺功能亢进、慢性肾功能不全、铅中毒等。

  4)骨髓造血功能减退: 某些药物,如抗肿瘤药物、磺胺类药物、保泰松、有机砷等可抑制骨髓造血功能;物理因素,如X线、60钴、镭照射等可抑制骨髓造血功能。继发于其他疾病,如慢性肾功能衰竭;原发性再生障碍性贫血。

  (2)RBC增多

  1)相对增多:

  呕吐、严重腹泻、多汗、多尿、大面积烧伤、晚期消化道肿瘤而长期不能进食等引起血液浓缩、血液中有形成分相对增多,多为暂时性增多。

  继发性:

  ①心血管病:各种先天性心血管疾病,如房室间隔缺损。

  ②肺部疾病:肺气肿、肺源性心脏病、肺纤维化、矽肺和各种引起肺气体交换面积减少。

  ③异常血红蛋白病。

  ④肾上腺皮质功能亢进(库欣病):可能与皮质激素刺激骨髓使红细胞生成偏高有关。

  ⑤某些药物,如肾上腺素、糖皮质激素、雄激素等。

  原发性: 如真性红细胞增多症(PV)、良性家族性红细胞增多症。

  血红蛋白测定

  【检测原理】

  1.氰化高铁血红蛋白HiCN测定法:除SHb外

  ICSH推荐参考方法,具有操作简单、显色快、结果稳定可靠、读取吸光度后可直接定值等优点。致命的弱点是氰化钾(KCN)试剂有剧毒,使用管理不当可造成公害。

  氰化高铁血红蛋白测定法操作

  (1)直接测定法

  ①加转化液:试管内加5ml HiCN转化液

  ②采血与转化:取全血20μl,加到盛有转化液的试管底部,用上清液反复冲洗吸管3次,充分混合,静置5min。

  ③测定:以符合WH0标准的分光光度计,波长540nm处,光径(比色杯内径)1.000cm,HiCN转化液或蒸馏水调零,测定吸光度(A)。

  ④计算:根据样本的吸光度(A)直接计算出血红蛋白浓度(g/L)

  (A为测定管吸光度,44为毫摩尔消光系数,64458/1000为1mol/L Hb溶液中所含Hb克数,251为稀释倍数。)

  (2)HiCN标准液比色法测定

  HiCN参考液(50g/L、100g/L、150g/L、200g/L),分别测得540nm处的吸光度,以参考液血红蛋白含量为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线或求出K值。

  ①标准曲线绘制和K值计算

  ②样本吸光度(A)

  ③通过标准曲线查出样本血红蛋白浓度,或用K值计算,血红蛋白浓度Hb(g/L)=K×A。

  注意事项

  (1)标本:异常血浆蛋白质、高脂血症、白细胞数超过30×109/L、脂滴等可产生浊度,干扰Hb测定。

  (2)HiCN转化液是一种低离子强度、pH近中性 的溶液(7.2±0.2)。样本中白细胞过高或球蛋白异常增高时 ,HiCN比色液会出现浑浊。

  (3)HiCN贮存:转化液贮存在棕色有塞玻璃瓶中 ,不能贮存在塑料瓶中,否则会使CN-丢失,测定结果偏低。HiCN转化液在4℃保存一般可数月,不能在0℃以下保存 ,因为结冰可使高铁氰化钾还原,试剂失效。

  (4)氰化钾试剂是剧毒品 ,测定后的废液应收集于广口容器中,首先以水稀释废液 (1:1),再按每升上述稀释液加次氯酸钠35ml ,充分混匀,敞开容器,放置15h以上 ,使CN-氧化成C02和N2挥发,或水解成C032-和NH4+,再排入下水道。废液不能直接与酸性溶液混合,因为氰化钾遇酸可产生剧毒的氰氢酸气体。

  2.十二烷基硫酸钠血红蛋白SDS测定法:

  具有操作简单、呈色稳定、准确性和精确性符合要求、无公害 等优点。但由于摩尔消光系数尚未最后确认,不能直接用吸光度计算Hb浓度,而且SDS试剂本身质量差异较大,会影响检测结果。

  3.HiN3最大吸收峰542nm,显色快,结果稳定。

  【参考值】

  成年男性:120~160g/L(士/师:120~170g/L)

  成年女性:110~150g/L

  新生儿:170~200g/L

  【临床意义】

  Hb的临床意义与红细胞计数相似,但判断贫血程度优于红细胞计数 。根据Hb浓度可将贫血分为4度。

  (1)某些疾病,血红蛋白和红细胞浓度不一定能正确反映全身红细胞的总容量。 如大量失血时,在补充液体前,虽循环血容量缩小,但血液浓度很少变化,从血红蛋白浓度来看,很难反映出存在贫血。如水潴留时,血浆容量增大,即使红细胞容量正常,但血液浓度减低,从血红蛋白浓度来看,已存在贫血。失水时,血浆容量缩小,即使血液浓度增高,但红细胞容量减少,从血红蛋白浓度来看,贫血不明显。

  (2)发生大细胞性贫血或小细胞低色素性贫血时,红细胞计数与血红蛋白浓度不成比例。大细胞性贫血的血红蛋白浓度相对偏高,小细胞低色素贫血的血红蛋白减低,但红细胞计数可正常。

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